紫外分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的 結果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
影響紫外分光光度計光度準確度的主要因素有以下幾個方面:
① 儀器的雜散光大小。
② 儀器的光度噪聲。
?、?儀器的基線平直度。
?、?儀器的光譜帶寬。
?、?試樣的來源, 包括樣品的制備, 取樣的方法。
?、?樣品的制備, 包括稱量、容量、溶劑、試劑、pH 值、時間、溫度等。
?、?比色皿的性能等。
由此可知, 光度準確度或吸光度誤差AA ( 或ΔA) 是一個綜合性的技術指標。要使用紫外可見分光光度計測得準確可靠的數(shù)據(jù), 必須注重上述幾個方面的影響。否則, 不可能得到準確可靠的數(shù)據(jù)。特別應該指出的是, 在給出吸光度誤差AA (或ΔA) , 同時也給出透射比誤差TA ( 或ΔT) 時, 二者不能相互矛盾。